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qPCR實驗結(jié)果分析基本步驟(三)
發(fā)布時間: 2021-10-15 點擊次數(shù): 1606次未經(jīng)處理的擴(kuò)增曲線對數(shù)圖如下。
以下情況,基線不需要調(diào)節(jié):
1、樣本擴(kuò)增曲線剛好在基線最大值的地方開始。
2、濃度最高的樣本,即擴(kuò)增曲線最快進(jìn)入指數(shù)期的,Ct值小于15(基數(shù)上限)。
以下情況,基線需要調(diào)節(jié):
1、最高濃度樣本的擴(kuò)增曲線,起始點在基線最大值前面,表明基線太高??梢詫⒒€結(jié)束值調(diào)小1~2個循環(huán)。
2、最高濃度樣本的擴(kuò)增曲線,起始點距離基線最大值太遠(yuǎn),表明基線太低。可以將基線結(jié)束值調(diào)大1~2個循環(huán)數(shù)。
這兩種情況,擴(kuò)增曲線對數(shù)圖均會出現(xiàn)“破壞斷裂",即圖中紅色圈住的地方。
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